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Master Mix Taq Pol HotStart Ab+ (2X) | Master Mixes Cellco
Master Mix Taq Pol HotStart Ab+ (2X)
Ficha técnica
Código | Master Mix Taq Pol HotStart Ab+ (2X) |
Categoria | PCR Convencional |
Marca | Cellco |
Descrição Geral
Master Mix Taq Pol HotStart Ab+ (2X) | Master Mixes - Cellco
Master mix com polimerase ativada por temperatura
Pronto para uso
For in vitro use only!
Envio: Shipped on blue ice
Condições de armazenamento: Store at -20 °C
Avoid freeze/thaw cycles. Hot Start Taq Pol Master Mix (2X) is also stable for three months at 4°C, so for frequent use, an aliquot may be kept at 4°C.
Validade: 12 months
Kit contents:
2x Hot Start Taq Pol Master Mix (purple cap)
Master mix of thermostable Hot Start DNA polymerase, dATP, dCTP, dGTP, dTTP, KCl, MgCl and stabilizers.
Master mix of thermostable Hot Start DNA polymerase, dATP, dCTP, dGTP, dTTP, KCl, MgCl and stabilizers.
Descrição:
Hot Start Taq Pol Master Mix contains Hot Start Taq Polymerase in an optimized PCR buffer with Mg2+ and dNTPs. It contains all reagents required for PCR (except template and primer) in a premixed 2x concentrated ready-to-use solution. The Master Mix is recommended for use in routine PCR reactions. It is optimized for high specificity and guarantees minimal byproduct formation. Antibody-based hot start technology avoids nonspecific amplification and enables room temperature reaction setup. The engineered Taq DNA Pol hot start enzyme allows amplification of fragments up to 5 kbp.
PCR Reaction Setup:
Use the quantities below to prepare a single 50 µl PCR reaction. Thaw, mix, and briefly centrifuge each component before use. Add the following components to a microcentrifuge tube:
1. Prepare PCR master mix
Note: Consider the volumes for all components listed next steps to determine the correct amount of water required to reach your final reaction volume.
Component | 50 μL rxn | Final conc. |
Water, grade PCR | to 50 μl | - |
2 X Hot Start Taq Pol Master Mix | 25 μl | 1x |
Mix and briefly centrifuge the components.
2. Add template DNA and primers
Component | 50 μl rxn | final conc. |
Forward primer (10 μM) | 0,5 – 2,5 μl | 0,1 – 0,5 μM |
Reverse primer (10 μM) | 0,5 – 2,5 μl | 0,1 – 0,5 μM |
Template DNA | x μl | 10 pg – 1 μg* |
Cap each tube, mix, and briefly centrifuge the content.
3. Incubate reactions in a thermal cycler
Recommended cycling conditions:
Initial denaturation | 95 °C | 1 min | 1x |
Denaturation | 95 °C | 15 - 30 sec | 30 cycles |
Annealing** | 45 - 68 °C | 15 - 30 sec | 30 cycles |
Elongation*** | 72 °C | 30 sec - 4 min | 30 cycles |
Final extension (optional) | 72 °C | 2 min | 1x |
Hold | 4 – 8 °C | ∞ | 1x |
**The annealing temperature depends on the melting temperature of the primers used
***The elongation time depends on the length of the fragments to be amplified. A time of 1 min/kb is recommended.
For optimal specificity and amplification an individual optimization of the recommended parameters may be necessary for each new template DNA and/or primer pair.
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