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Master mix Taq Pol (2X) Green | Master Mixes Cellco

Master mix Taq Pol (2X) Green

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Ficha técnica
CódigoMaster mix Taq Pol (2X) Green
CategoriaPCR Convencional
MarcaCellco
Descrição Geral

Master mix Taq Pol (2X) Green | Master Mixes - Cellco
Master mix para carregamento direto em géis de eletroforese
Pronto para uso, verde

For in vitro use only!

Envio: Shipped on blue ice
Condições de armazenamento: Store at -20 °C
Avoid freeze/thaw cycles. Taq Pol – Master mix (2X) is also stable for three months at 4°C, so for frequent use, an aliquot may be kept at 4°C.
Validade: 12 months
 
Kit contents:
2x Taq Pol Master Mix (purple cap)
Composition: 0.05 U/ µL Taq DNA polymerase, reaction buffer, 3 mM MgCl2, 0.4 mM of each dNTP (dATP, dCTP, dGTP, dTTP), dye, 2 gel loading buffer and stabilizers.
 
Descrição:
Taq Master Mix contains Taq Polymerase in an optimized PCR buffer with Mg2+ and dNTPs. The master mix is supplemented with tracking dyes for direct loading of PCR products on gels. It contains all reagents required for PCR (except template and primer) in a premixed 2x concentrated ready-to-use solution. The Master Mix is recommended for use in routine PCR reactions. It is optimized for high specificity and guarantees minimal by-product formation. The tracking dyes in the master mix do not interfere with PCR performance and are compatible with downstream applications such as fluorescent automatic DNA sequencing, ligation, and restriction digestion. The blue dye migrates with 3-5 kb fragments and the yellow dye migrates faster than 20 bp (1% agarose gel).
 
PCR Reaction Setup:
Use the quantities below to prepare a single 50 µl PCR reaction. Thaw, mix, and briefly centrifuge each component before use. Add the following components to a microcentrifuge tube:
 
1. Prepare PCR master mix
Note: Consider the volumes for all components listed next steps to determine the correct amount of water required to reach your final reaction volume.
Component50 μL rxnFinal conc.
Water, grade PCRto 50 μl-
2 X Taq Pol Master Mix25 μl1x
Mix and briefly centrifuge the components.
 
2. Add template DNA and primers
Component50 μl rxnfinal conc.
Forward primer (10 μM)0,5 – 2,5 μl0,1 – 0,5 μM
Reverse primer (10 μM)0,5 – 2,5 μl0,1 – 0,5 μM
Template DNAx μl10 pg – 1 μg*

*genomic DNA: 1 ng – 1 μg; plasmidial DNA: 1 pg – 1 ng

 
Cap each tube, mix, and briefly centrifuge the content.
 
3. Incubate reactions in a thermal cycler
Recommended cycling conditions:
Initial denaturation95 °C1 min1x
Denaturation95 °C15 - 30 sec30 cycles
Annealing**45 - 68 °C15 - 30 sec30 cycles
Elongation***72 °C30 sec - 4 min30 cycles
Final extension (optional)72 °C2 min1x
Hold4 – 8 °C1x
**The annealing temperature depends on the melting temperature of the primers used
***The elongation time depends on the length of the fragments to be amplified. A time of 1 min/kb is recommended.
 
For optimal specificity and amplification an individual optimization of the recommended parameters may be necessary for each new template DNA and/or primer pair.

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